T4 DNA Ligase在ATP作为辅助的情况下，可以特异性催化双链DNA或者双链RNA的5’磷酸和3’羟基之间形成 磷酸二酯键。本产品对与粘性末端和平末端的双链核酸片段均有较高的连接活性，同时，对于双链DNA，双链 RNA或者DNA-RNA杂交链中的缺刻（Nick）也有修复作用。但是本产品无法催化单链核酸之间的连接。