2025-05-19
DNA甲基化（DNA Methylation）是表观遗传修饰的核心机制之一，是指在DNA分子特定碱基上添加甲基（-CH₃）的化学修饰过程。在哺乳动物中，甲基化主要发生在胞嘧啶（C）的第五位碳原子上，形成5-甲基胞嘧啶（5mC），且通常发生在CpG二核苷酸（即胞嘧啶后接鸟嘌呤的序列）位点。
DNA甲基化是细胞分化、发育调控和疾病发生的关键表观遗传开关，主要功能包括：基因表达调控、基因组稳定性维护、细胞身份决定等。异常的DNA甲基化是多种疾病的重要标志，包括神经退行性疾病、自身免疫疾病、代谢性疾病等，尤其在癌症中研究最为深入。目前对DNA甲基化的研究方法分为全基因组水平和靶向区域分析。在全基因组层面，全基因组甲基化测序（Whole Genome Bisulfite Sequencing，WGBS），可将基因组DNA中未发生甲基化修饰的胞嘧啶C转化为尿嘧啶U，通过对处理后的DNA进行全基因组测序，并与参考基因组进行比对，从基因组水平实现单碱基分辨率的、高精确度甲基化水平分析。 除了WGBS外，全基因组层面甲基化检测技术还有RRBS和甲基化芯片。
然而在面对特定目标基因或CpG 位点区域的甲基化检测，全基因组水的甲基化检测成本较高、周期较长、且无法准确解决问题，需要更加灵活的靶向甲基化测序方案。 传统BSP技术针对特定研究区域设计特异BSP引物，通过将DNA进行亚硫酸盐处理后使用BSP引物扩增，然后 对 BSP 产物进行 TA 克隆， 选择 10-30 个克隆进行测序，计算甲基化水平；由于实验步骤多，选择克隆数量有限，因此检测准确性不高，检测费用却很高。甲基化焦磷酸测序技术可以对 BSP 产物进行直接焦磷酸测序，很好地替代了传统 BSP，可以检测 3-5%的甲基化差异，但是由于检测长度较短，成本较高。
基于亚硫酸盐多重 PCR 捕获核心技术和NGS 高深度测序的目标区域甲基化测序Targeted Bisulfite Sequencing（TBS）应运而生。TBS技术结合了多重 PCR 扩增的高效性和二代高通量测序的准确性，同时又解决了传统 BSP 和焦磷酸测序按照位点/区域收费的高成本模式，实现了按照样本收费(与每个样本检测位点/区域数无关)，TBS技术 满足几个到上百个基因/CpG 位点的检测, 具有高准确性、高通量、低成本、快周期的优势；广泛用于临床样本多位点的甲基化 Biomarker 筛选、验证及临床转化应用。
TBS技术优势
针对 感兴趣的目标区域甲基化检测，高效灵活
每个位点的平均测序深度大于 200X，可以检测每个位点1％的甲基化差异
对目标区域的每个 CpG 位点进行绝对定量，具有更高的准确性。
可同时检测几百个区域/CpG 位点
低成本、快周期，超高性价比
实验流程
结果展示
各目标区域组间样本的甲基化水平的可视化
多样本目标区域甲基化水平聚类热图
目标区域 CG 甲基化水平组间比较
无论您是科研机构探索表观遗传机制，还是医疗机构开发临床诊断方案，TBS技术均能以高性价比、高靶向性、高可信度的优势，助您快速突破研究瓶颈，抢占学术与产业先机！立即联系我们，获取靶向甲基化定制化解决方案与技术支持，共同开启甲基化研究的精准时代！
