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甲基化(BSP)

DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一,真核生物中甲基化仅发生于胞嘧啶,即在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下的CpG二核苷酸5’端的胞嘧啶转变为5’-甲基胞嘧啶。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。DNA甲基化通常抑制基因表达,去甲基化则诱导了基因重新活化和表达,这种DNA修饰方式在不改变基因序列的前提下实现对基因表达的调控。BSP(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)克隆测序法,是目前甲基化检测的金标准。


BSP实验原理:

用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后再CpG岛两端设计引物进行PCR,将目的产物纯化后进行TA克隆,每个克隆挑取阳性克隆测序,最后将测得的序列与原始序列比对,统计甲基化位点及数量,并分析甲基化程度。

DNA甲基化实验原理.jpg

基于重亚硫酸盐转化的甲基化分析原理


服务特点:

1、克服了MSP只能作定性研究,可做定量研究;

2、敏感性高,待测DNA5-甲基胞嘧啶分布极不均衡也可检测;

3、只要客户提供基因名称或序列,我们免费设计引物;

4、周期快:2周出结果。