2025-06-30
Highlights
1、免疫沉淀(IP)及其衍生技术 Co-IP、ChIP、RIP,如同 “分子捕手”,精准捕获蛋白、蛋白互作、蛋白 - DNA/RNA 互作。
2、四大技术各有专攻:IP 专注单一蛋白纯化,Co-IP 揭示蛋白 “社交圈”,ChIP 定位基因调控 “开关”,RIP 追踪 RNA “守护者”。
3、从原理到应用场景全面对比,助你选对实验工具,派森诺提供试剂耗材支持,护航科研之路!
在细胞这个精密运转的“微型宇宙”中,蛋白质、核酸等生物大分子时刻进行着复杂而有序的互动,犹如一场永不落幕的分子社交舞会。如何捕捉这些稍纵即逝的关键互动?免疫沉淀(IP)及其衍生技术——Co-IP、ChIP和RIP,正是科学家们手中强大的“分子捕手”,助力我们揭示生命活动的核心机制。
一、IP实验:精准捕获的“单兵作战”
核心原理: 利用抗原-抗体结合的高度特异性。将针对特定目标蛋白(抗原)的特异性抗体固定在固相载体(如磁珠)上,当与细胞裂解液混合时,抗体便能像磁铁一样“抓住”溶液中的目标蛋白,形成免疫复合物。通过洗涤去除杂质,最终获得高度纯化的目标蛋白。
二、Co-IP实验:挖掘互作伙伴的“社交网络”
核心原理: 在IP的基础上更进一步。利用抗体捕获“诱饵”蛋白(Bait Protein)时,与“诱饵”蛋白在生理条件下稳定结合的“猎物”蛋白(Prey Protein)也会被一同“钓”下来,形成复合物。通过特异性检测(如Western Blot)复合物中的组分,即可确定与诱饵蛋白相互作用的伙伴。
三、ChIP实验:定位基因调控的“时空密码”
核心原理: 将IP技术与DNA分析相结合,用于研究蛋白质与DNA的相互作用。首先用甲醛等交联剂将细胞内与DNA结合的蛋白质“固定”在其结合位点上。裂解细胞并将DNA打断成片段。用针对目标蛋白(如转录因子、组蛋白修饰)的抗体进行免疫沉淀。此时,与目标蛋白结合的DNA片段也会被共沉淀下来。解除交联并纯化DNA后,即可通过PCR、qPCR或高通量测序(ChIP-Seq)确定目标蛋白在基因组上的精确结合位点。
四、RIP实验:追踪RNA命运的“信使捕捉”
核心原理: 与ChIP类似,但研究对象是蛋白质与RNA的相互作用。无需甲醛交联(或使用温和交联),利用抗体沉淀目标RNA结合蛋白(RBP)。在沉淀过程中,与该RBP稳定结合的RNA分子(mRNA, lncRNA, miRNA等)也会被一同富集下来。纯化RNA后,可通过RT-qPCR、芯片杂交或高通量测序(RIP-Seq / CLIP-Seq)鉴定出哪些RNA是目标RBP的“客户”。
五、四大“IP”技术对比一览表

四大“IP”技术,虽共享“免疫沉淀”这一核心思想,却因检测目标(蛋白、互作蛋白、DNA、RNA)的不同而各显神通:
IP是基石,专注于单一目标的捕获。
Co-IP拓展疆域,揭示蛋白质间的“社交圈”。
ChIP深入核心,定位调控基因表达的“开关”。
RIP解码信息,追踪RNA生命周期的“守护者”。
六、小 结
IP、Co-IP、ChIP、RIP这四种基于免疫沉淀的强大技术,为科研人员提供了从蛋白质鉴定、互作研究到基因转录调控、RNA代谢解析的全方位解决方案。理解它们的原理、目标和应用场景,根据科学问题选择最趁手的工具,辅以严谨的实验设计和操作,助您在科研征途上收获丰硕成果!派森诺竭诚为大家提供蛋白互作研究实验过程中所涉及的试剂耗材,助力每一位生命科学实验室的科研人收获属于自己的完美实验结果,逐梦高分文章~
