2025-09-12
在植物单细胞测序研究中，获取高质量的细胞核是后续实验成功的关键前提。相较于原生质体分离，植物样本抽核技术能突破细胞壁坚韧、组织纤维化等限制，适用于更多难解离的植物组织（如木质化茎秆、成熟种子），且能有效保留细胞异质性。今天，我们就从抽核方法，常见问题与解决方案，全方位分享植物样本抽核的实战经验，帮你避开科研 “坑点”。
派森诺单细胞平台已成功完成5000+单细胞样本测序，有着丰富的项目经验，以下是部分派森诺曾做过的植物组织抽核样本类型：
一、抽核方案
1. 样本处理
冻存的植物组织在液氮中研磨成粉末状，转移至5ml管中备用。
2. 细胞核释放
加入3ml NIB裂解液，使用组织研磨仪磨碎组织，使细胞核释放，DAPI观察细胞核释放情况。
3. 清洗
使用NB溶液终止细胞核裂解，离心（根据不同组织类型调整离心力,范围在500-1000g）,5min。
4. 去杂质
通过流式分选DAPI阳性的细胞核，进行去杂质处理
5. 质检
流式分选后的细胞核离心，合适体积重悬后使用AOPI染料计数，荧光显微镜观察细胞核完整度。
二、常见问题与解决方案
1. 细胞核破裂率超过 20%怎么办？
研磨时减少时间（如从 5min 缩短至 3min），或更换为玻璃匀浆器（力度更温和）；
降低离心转速（如从 1000×g 降至 800×g），延长离心时间（从 10min 增至 15min）。
2. 细胞质 / 杂质污染严重怎么办？
增加过滤次数（如先用 70μm 筛网初滤，再用 40μm 筛网精滤），并确保每次过滤后用 NB 冲洗筛网；
在 NIB 中加入 2% PVP（去除酚类杂质）
三、部分结果展示
杨树根尖
杨树叶片
杨树茎
棉花根
柳树叶片
