
highlights
1:植物样本前处理是关键,常规组织需液氮速冻研磨,特殊样本(如高多糖多酚植物)需额外预处理去除杂质。
2:不同植物组织提取策略有别,高多糖多酚植物、特殊部位组织需适配专属方法或试剂盒。
3:选择试剂盒可从样本类型、DNA 质量要求、安全性入手,Qiagen、天根等品牌表现出色。
在植物分子生物学研究中,高质量基因组DNA的获取是PCR、测序、Southern blot等下游实验的基础。然而,植物样本种类繁多,特性各异,如何高效提取高质量DNA成为许多研究者的挑战。今天,我们就来聊聊植物基因组DNA提取的那些事,包括样本前处理技巧、不同植物类型的提取策略,以及国内外优秀试剂盒推荐。
一、植物样本的前处理:成功提取的第一步
对于常规植物组织(如叶片),采集后应立即用液氮冷冻,以防止DNA降解。研究表明,使用幼嫩植物样品并在采集后立即在液氮中冷冻,可以实现DNA高得率和极低程度的DNA降解。
研磨是前处理中的重要环节,需要将植物材料研磨至粉末状。对于试管树苗,将增殖生长30天左右的顶部嫩梢研磨成粉末后进行预处理,能显著提高DNA提取效果。
对于特殊样本(如富含多糖多酚的植物),可能需要额外的预处理步骤。中国科学院武汉植物园开发的专利方法包括使用HB抽提缓冲液重悬,涡旋混匀后过滤,以及多次使用抽提缓冲液洗涤等步骤,能有效去除杂质干扰。
二、不同类型植物样本的提取策略
不同植物组织由于其生化特性的差异,需要采用不同的提取策略:
1. 常规植物组织
对于菠菜、番茄、大豆、小麦等常规植物,大多数商用试剂盒都能胜任。PureLink™ 基因组植物 DNA 纯化试剂盒可在约40分钟内从多种植物样品中高效分离出总DNA,得到高质量DNA,且RNA污染极小。
2. 多糖多酚含量高的植物
对于茶叶、柑橘、香蕉等富含多糖多酚的植物,需要采用特殊的提取方法。这类植物中的次生代谢产物会干扰核酸提取,需要选用专门设计的试剂盒。天根DP360多糖多酚植物基因组DNA提取试剂盒采用特制裂解缓冲液与吸附柱技术,能有效去除多糖和多酚,确保提取出的DNA既完整又纯净。
3. 特殊部位组织
对于植物不同部位组织(如根、茎、种子、果实),提取方法也需要调整。研究表明,适当提高裂解液与样品比例能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。
三、国内外植物基因组DNA提取试剂盒推荐

四、如何选择试剂盒?
选择合适的植物基因组DNA提取试剂盒时,可以考虑以下几点:
样本类型:不同植物组织(如叶片、种子、果实)以及它们是否富含多糖、多酚等次生代谢物,是首要考虑因素。对于特殊样本,应选择针对性强的试剂盒(如天根DP350或碧云天D0046用于多糖多酚样本)。
DNA质量要求:下游应用(如PCR、测序、Southern杂交等)对DNA的纯度、完整性和浓度有不同要求。务必选择能提供相应质量DNA的试剂盒。
安全性与毒性:尽量避免使用含苯酚、氯仿等有毒试剂的方案,选择更安全的替代品。
一般来说,Qiagen和天根的试剂盒在多个独立研究中表现出良好的稳定性和提取效果,但价格可能相对较高。碧云天的试剂盒在快速和安全性方面有优势。
五、结语
植物基因组DNA提取是植物分子生物学研究的基础环节,选择合适的方法和试剂盒对实验成功至关重要。随着技术的进步,越来越多的高效、快速、安全的提取方法不断涌现,为科研工作者提供了极大便利。派森诺竭诚为大家提供国内外品牌植物基因组DNA提取试剂盒,助力每一位生命科学实验室的科研人收获属于自己的完美实验结果,逐梦高分文章~
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