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我寻着你的足迹---荧光定量PCR技术

2016-09-18

荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时监控PCR反应过程。随着PCR反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,计算待测样品初始模版的量。实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。它提高了普通PCR技术的特异性和准确性,广泛应用于基础研究、临床检验、海关商贸检疫等各个领域。


1.相对定量

包括RNA提取、反转录和扩增,采用SYBR Green I法和TaqMan探针法两种方式,一般采用2-△△CT法进行计算,每个样本包含三次技术重复。

项目结题后提供完整详细的的结题报告,包括技术路线、实验具体操作、扩增曲线、融解曲线和具体的实验数据分析及完善的后期技术支持。

结果示例

          扩增曲线                        融解曲线


表达定量(2-△△CT


2.绝对定量

需要制备标准品并建立标准曲线,然后检测目的样本中的基因,比对标准曲线得到基因准确拷贝数。

项目结题后提供完整详细的结题报告,包括技术路线、实验具体操作、标准曲线、扩增曲线和具体的实验数据分析及完善的后期技术支持。

结果示例


标准曲线


 

扩增曲线


3、我们的优势

①专业平台

RAININ电动移液器,准确、稳定移液;

使用定量PCR仪中常用的ABI StepOne Plus,稳定性好;

核心试剂采用美国原装进口KAPA试剂,优异的信号和反应效率,实验结果准确,重复性好。

②丰富的qPCR经验

基因类别有DNA、mRNA、miRNA;物种类别有人、鼠、鸡、蓝藻、酵母菌、反硝化菌、线虫、苹果、核桃等等。

③周期短

一周出结果


4、需客户提供

详细的实验要求,数据分析要求,基因名称(提供Genbank登录号),待测样本(清晰样品编号),保证样本质量。