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干货 | 为什么推荐你做降解组测序?(一)

2020-06-19


降解组测序是利用高通量测序平台批量鉴定miRNA真实靶基因的技术,miRNA通常起到抑制或降解mRNA的作用,从而影响基因功能的发挥。



降解组技术介绍(点击查看)




降解组文献分享(点击查看)



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寻找miRNA靶基因的常规手段最常见的有两类,一类是生信手段:基于序列信息通过Target Scan、miRanda等软件预测。一个miRNA可以靶向多个mRNA,一个mRNA也可以被多个miRNA靶向结合,所以通过生信预测出来的结果信息量会很庞大,且假阳性高,需要在海量的靶向关系中找到关键基因来做实验验证。另一类是实验手段:如利用AGO蛋白做RIP(RNA免疫共沉淀),以及CLIP、生物素下拉等方法。实验方法一般操作复杂,依赖抗体与试剂的好坏与质量,且人为操作过程中影响因素太多,除了这些外界因素外,还受抗体特异性、交联效率,背景噪音等因素影响,属实有点费力不一定讨好的样子。

降解组测序可以同时解决上述手段存在的问题。通量高,结果准,不需要做复杂的实验。且降解组测序不需要生物学重复,如果同时做转录组或者Small  RNA测序,每个组的生物学重复混成一份样品做降解组测序就行啦!

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技术流程



主要基本分析内容


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miRNA在mRNA上剪切位点t-plot图



个性化分析内容


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降解组一般都是结合转录组以及小RNA测序数据一起阐明基因表达调控机制,早做早发文章哦~