2020-11-30
关于DIA，你是否已经听了太多次，但依旧似懂非懂，脑袋一团乱麻？
今天小派就给大家介绍一下蛋白质组质谱检测技术— DIA(数据非依赖采集技术，data-independent acquisition)。
研究基因组和转录组学的老师也不要错过哦，毕竟蛋白质才是生物功能的主要体现者与执行者，才能更直接阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。
什么是DIA？技术原理？
DIA（Data independent acquisition）是一项全新的、全息式数据非依赖性采集定量技术，可以依次对特定质量范围内的所有母离子进行碎裂，采集所有母离子的碎片离子信息进行蛋白定性和定量。
DIA技术是先利用常规DDA质谱检测技术分析建立图谱库，之后采用DIA方法进行质谱数据采集，从而实现对样品中蛋白质的定性及定量，不同于传统的DDA技术，DIA技术将整个质谱扫描质量范围分为若干小窗口，依次对每个窗口的所有离子进行碎裂，使其能够对扫描区间内的所有肽段离子进行高速一级MS扫描，再进行二级MS/MS分析，该技术无需指定目标肽段，可以无遗漏地获得样本中所有离子的全部碎片信息，数据利用度大大提高。
DIA技术流程？
DIA技术作为一项新技术，还有需要完善的地方。技术难点主要在于二级谱图成分复杂，生信分析较为困难。因而，目前要想采用DIA技术，必须先利用常规DDA质谱检测技术分析建立图谱库，之后采用DIA方法进行质谱数据采集，从而实现对样品中蛋白质的定性及定量。
DIA技术流程
DDA与DIA的区别？
DDA二级质谱只能够采集一级谱图信号最强的 Top20 的信息，所以说会造成信息遗漏。DIA将质谱整个全扫描范围分为若干个窗口，高速、循环地对每个窗口中的所有离子进行选择、碎裂和检测，因此可以无遗漏地获得样本中所有离子的全部碎片信息，数据利用度大大提高，缺失值更少。因此，DIA技术更适合大量样本、复杂体系的蛋白检测。
DIA技术优势？
相对于传统的是DDA，DIA具有如下技术优势：
● 全景式扫描，数据无遗漏，蛋白质覆盖率、定量准确性高
● 样本无需分馏分上机，极大缩短了每个样品的检测周期；不受样本量限制，可用于大规模样本数量检测
● 相比于DDA模式，DIA缺失值更少，鉴定与定量结果的可重复性更高，数据可回溯
DIA应用领域？
DIA主要用于大规模寻找差异蛋白和大样本量的定量研究，并且因为DIA在鉴定蛋白数目、重复性、定量准确性等方面都优于DDA，数据利用度大大提高，因此也非常适合应用于生物标记物的筛选。
