2020-12-07
小伙伴们大概已经发现了,无论哪篇单细胞测序的文章,都会告诉读者一共获得了多少个细胞进行分析,并且细胞的数量基本都在1万以上,高分文章,细胞数量则可达十几万甚至几十万。比如,这篇今年发表的nature文章,一共做了23个器官,捕获到了35万多个细胞,堪称航空母舰级别。
细胞数量,为什么这么重要?细胞数量,是越多越好吗?高分文章,一般需要多少个细胞?我们的研究中,该如何设定细胞数量? 相信这些问题,小伙伴们一定都很关注吧。 细胞数量,为什么这么重要? Bulk RNA测序,一般需要设置三个生物学重复。常常有小伙伴会问,单细胞测序,怎么设置生物学重复呢?一般情况下,单细胞测序的一个细胞,可视为一个重复,当然,当目光聚焦到单个细胞个体,生物学重复就需要是成千上万级别了。细胞数目越多,区别不同细胞之间的差异越精确,研究细胞间精细的差异意义越显著。所以,提高细胞总数,是一个比较有意义的建议。 高分文章,一般需要多少个细胞? 高分文章,一般需要多少个细胞?统观目前的单细胞测序文章,大概分为两类。一是对细胞图谱的描绘,这样的工作,对各类细胞做了精确描述,细胞总数,大概都达到十万以上。这样的工作,通常会发很高的杂志,因为其数据是一个非常重要的资源,对未来的科学研究具有很大的意义。前面提到的这篇nature文章,就属于这一类。 另外一类,则是以单细胞测序作为一种研究手段,着力于研究某一个生物学问题。这样的文章,通常是更值得研究者借鉴的文章,对细胞总数的要求,也相对低一点,我们不妨挑选几篇文章,做一个详细的比较。 1、 发表杂志:Nature 发表时间:2020年 影响因子:42.788 研究领域:神经发育 细胞分选:否 共计细胞数:59379 样本数:16 每样本平均细胞数:3712 2、 发表杂志:Nature Neuroscience 发表时间:2020年 影响因子:20.271 研究领域:神经发育 细胞分选:否 共计细胞数:28726 样本数:4 每样本平均细胞数:7182 3、 发表杂志:Nature Communications 发表时间:2020年 影响因子:12.121 研究领域:新冠 细胞分选:否 共计细胞数:13239 样本数:5 每样本平均细胞数:2648 4、 发表杂志:Cell Reports 发表时间:2019年 影响因子:8.109 研究领域:胃癌 细胞分选:否 共计细胞数:56440 样本数:13 每样本平均细胞数:4342 5、 发表杂志:Cell 发表时间:2020年 影响因子:38.637 研究领域:肿瘤免疫 细胞分选:CD4+,CD8+ 共计细胞数:19839(CD4+), 10762(CD8+) 样本数:7 每样本平均细胞数:2834(CD4+),1538(CD8+) 6、 发表杂志:Cancer Discovery 发表时间:2020年 影响因子:29.497 研究领域:肿瘤免疫 细胞分选:CAF-F1 共计细胞数:18296 样本数:8 每样本平均细胞数:2287 我们的研究中,该如何设定细胞数量? 根据以上文章,我们可见,细胞总数,一般都需要达到万级甚至十万级。而单个样本中的细胞数目,都没有超过1万。细胞浓度越高,油包水结构中捕获到双细胞的概率越高。如果想要细胞的分群更精确,细胞总数需要提高,更推荐的方案是提高样本数量,而不是提高细胞悬液的浓度。 小伙伴们,关于细胞数量的设定策略,你是否get到了呢~