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【干货】转录组韦恩图“食用”指南

2021-03-17


韦恩图,又称为venn图,是我们在日常数据处理过程中经常用到的一种图。图虽小,但实用性却非常高!

做转录组项目,重要的就是看每个基因的表达量,根据表达量差异找出差异基因,从而研究差异基因的功能。而在作图之前重要的就是按照特定条件找出差异基因,此方面我们分为三类来介绍如何按需筛选差异基因:

1.共有差异基因;

2.共有上调基因或共有下调基因;

3.一组上调,另一组下调基因。

在转录组项目提供的结果中,有一个差异基因汇总的表格名为diff_gene_of_all_groups,它就是我们今天数据来源的主角了,一般安安静静的躺在这里:

图片1.png


我们通篇软文干货的讲解都以此数据为基础,我们假设有四个分组:A、B、C、D

六个比较组:A_vs_B、A_vs_C、A_vs_D、B_vs_C、B_vs_D、C_vs_D

在Excel表格中有一个多条件筛选功能,这个功能对于提高效率有着质的飞跃:

1. 共有差异基因

在diff_gene_of_all_groups表格中,上调的基因标为up,下调标为down,--为非显著差异基因。假如我们想查找在A_vs_B、A_vs_C中的共有差异基因,只需要按以下操作:

图片2.png


①点击筛选

②选择A_vs_B组

③选择up和down(上调和下调)

④A_vs_C组进行同样操作

此时第一列筛选出的所有基因即为A_vs_B和A_vs_C两组共有的差异基因,下图:

图片3.png

同理如果想筛选出三组或更多组的共有差异基因都可按此来操作。


2. 共有上调基因或共有下调基因

有了上面的铺垫,我们接下来的讲解就变得容易了很多,共有上调(下调)基因只需在1的基础上,把③和④(选择up和down)改为选择up(或down)即可。

图片4.png


3. 一组上调,另一组下调

前面操作一致,只需要在上述操作中把③和④分别改为A_vs_B选择up且A_vs_C选择down。

图片5.png

同理如果想要获取多个组不同类型(上下调)的共有差异基因,可以根据需求在比较组中自由选择。

讲到这里,我们作图数据就算是整理好了,接下来开始讲解本文的主体部分,韦恩图的制作。韦恩图的制作网站和方法千千万万,我们这里选取典型的三种来为大家讲解。


一、云分析

如果您的项目是我们的真核有参转录组云平台项目,那么韦恩图的制作对您来说就要相对简单一些,因为我们的云平台会自动的将您的比较组进行整理罗列,您只需按照下图方式进行选择,即可自由选择比较组制作韦恩图。

图片6.png

除此之外,还提供了一些简单的图表调整:

图片7.png

当然您也可以在分析设置界面,自由调整分组方案以及比较方案:

图片8.png



二、派森诺基因云的“云图汇”小工具

韦恩图作图网址:https://www.genescloud.cn/chart/VennPlot

在使用小工具之前要先注册一个账号,注册完成后就可以使用所有小工具了(免费哦~),除了韦恩图之外还有很多其他实用小工具供选择,感兴趣的老师可以去网站看一看。

还是以上文原始数据为例,如何制作A_vs_B、A_vs_C、A_vs_D三个比较组上调基因的韦恩图呢?

首先,将每个比较组中的上调基因筛选出来:

图片9.png

参照上文Excel筛选功能,将A_vs_B组筛选处选为up,第一列中的gene_id即为A_vs_B组所有的上调基因。将其单独放到一个Excel表格,并标为A_vs_B列。

图片10.png

同理筛选A_vs_C和A_vs_D比较组:

图片11.png

图片12.png

注意:细心的老师可能已经发现了,在筛选A_vs_C和A_vs_D比较组时,A_vs_B比较组的筛选条件已经从up调回了all(即--+up+down)。在选取一个比较组的上调基因时一定要确保不受其他组干扰!

将三组合并到同一个Excel之中:

图片13.png

此时我们的作图数据已整理完毕,但是我们的云图汇小工具暂时只支持txt、tsv、csv三种格式,所以我们需要做一步格式转换,右击另存为文本文件或者CSV格式即可。

图片14.png

最后按照图示顺序上传数据即可:

图片15.png

可点击上图4处下载高清PDF格式图片。

另如果想知道上述交集处数字9代表的是哪些基因,应该怎么做呢?

当然简单的方法即是点击数字9即可在下方滚动区域显示gene_id列表。

除了上述方法外我们还有另一种方法可以选择:

只需要按照上述筛选功能在Excel表格中倒推即可。选择在三个比较组中都上调的基因,下图所示第一列即为在三个比较组中都上调的基因(正好是9个,还可验证作图是否正确):

图片16.png

 同理也可推出其他交集数字所代表的基因是哪些,按照比较组上下调关系筛选即可。


三、韦恩图在线绘制网址-jvenn

网址:http://jvenn.toulouse.inra.fr/app/example.html

图片17.png

如上图所示,该网站整体界面非常简洁,可以直接将gene list粘贴到网站上无需上传文件,且支持最多六个比较组的韦恩图制作(上述两种方式最多只能制作五个比较组的韦恩图)。也可在右下方自由更改组名以及填充颜色。

该网站还支持直接导出CSV格式的表格,方便直接查看各个比较组的共有差异基因:

图片18.png

以上就是今天给大家介绍的三种韦恩图作图方式了,是不是既简单又实用呢~大家可以根据自己的喜好来进行选择。

欢迎关注我们的公众号,我们会持续不断的更新简单实用的干货技巧,为您的科研征途献上一份自己的力量!