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【派森诺基因云】5分钟带您看懂QIIME 2云分析之LEfSe分析

2021-05-06

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对于QIIME 2云分析,我们悉心整理了各个分析模块中的热点分析内容,推出了“5分钟小课堂系列”。通过上一讲的MetagenomeSeq分析,相信大家对差异分析有了更深入的理解。今天我们将继续对“物种差异与标志物种分析”中的LEfSe分析这一差异分析工具进行讲解。


LEfSe分析

LEfSe(LDA Effect Size)分析是一种将非参数的Kruskal-Wallis以及Wilcoxon秩和检验,与线性判别分析(Linear discriminant analysis,LDA)效应量(Effect size)相结合的分析手段。与MetagenomeSeq分析类似,LEfSe分析也是一种差异分析方法;但LEfSe分析可以直接对门/纲/目/科/属/种的各级分类水平同时进行统计检验和差异分析。同时,LEfSe更强调寻找分组之间稳健的差异物种,即标志物种(Biomarker)。它的一大特点是,不仅局限于对不同样本分组中的群落组成差异进行分析,更可以深入到不同的子分组(Subgroup)中,挑取在不同子分组中表现一致的标志微生物类群。

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LEfSe分析原理

LEfSe的分析结果包括两部分,分别是物种分类学分枝图(Cladogram),用以展示在各组群落样本中显著富集的标志物种的分类学层次分布;以及显著差异物种LDA值分布柱状图,用以展示每个组内显著富集的物种(注意不显示显著下调的)及其重要性程度。

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(点击看大图)

物种分类学分枝图(Cladogram)图解

需要注意的是,LEfSe分析中,标志物种的筛选有两个阈值,即P<0.05、且LDA≥2(默认,越高越严格),只有同时满足这两个条件时,该分类单元才能被认为是标志物种。

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(点击看大图)

显著差异物种LDA值分布柱状图图解。由图可知,放线菌门(p__Actinobacteria)在组间存在显著差异,且在A组(蓝色)中被显著富集,丰度最高(即A组中的放线菌门的丰度显著高于其他各组);同时,放线菌门的LDA得分值大于其它分类单元,表明其对组间差异的影响更大。

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